H1N1病毒-（2）

　　构建猪流感病毒亚单位基因工程疫苗的方法有多种，其中报道较多的包括：
　　1）利用原核表达系统（大肠杆菌系统）或真核表达系统（酵母系统） 在体外表达猪流感病毒流行毒株的HA基因和NA基因，然后收获、浓缩和纯化目的蛋白，再进一步制苗免疫。这种方法的优点是制备过程简单、目的蛋白产量大、 主要成分可以定量配置。但由于体外表达的蛋白难以维持或恢复天然蛋白的空间结构，蛋白纯化过程复杂、成本高，而且总体免疫效果尚不及传统的全病毒灭活疫 苗，因此对这类疫苗从工艺方面还需进一步改进。
　　2）将猪流感病毒免疫原（HA和NA）基因单独或者与细胞因子（白介素－6、Y干扰素等）编码 基因串联后克隆到真核表达质粒中，然后再将重组DNA质粒导入机体细胞，通过机体内源性表达并提呈给免疫系统，诱导宿主产生特异性免疫应答，发挥保护作 用，这就是所谓的DNA疫苗。研究结果表明，单纯依靠猪流感病毒HA基因免疫的DNA疫苗效果并不理想（特异性抗体水平低、攻毒保护性差），如果共表达一 些具有免疫调节作用的细胞因子，或者使用DNA疫苗后再用常规灭活疫苗进行加强免疫，则可以明显提高免疫保护水平。但总体来看，这类DNA疫苗的免疫效果 不确实，重复性差，与传统全病毒灭活疫苗相比尚有一定差距，从实验室阶段到开发出成型产品还需要较长的时问。
　　3）活载体基因工程亚单位疫苗。 目前，这是被人们寄予较大希望，并有可能实现商品化的疫苗。被用作载体的包括人腺病毒5型（human adenovirus 5，HAd5）、猪腺病毒3型（porcine adenovirus 3，PAV3）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、杆状病毒（baculovirus）等。其中研究比较成熟的是以腺病毒为载体的猪流感亚单位基因工程疫苗，例 如华南农业大学等单位开发的部分产品已进入转基因安全评价和临床实验阶段，预期开发前景良好。腺病毒载体具有许多优点：①腺病毒粒子相对稳定，病毒基因组 重排频率低，在包装细胞内能有效复制；②安全性较好，尚未发现腺病毒与宿主基因的整合；③腺病毒基因组较大（约36kb），对外源基因的容量也大（目前已 证实外源DNA插入容量可达7.5kb）；④腺病毒除了可在肠道和呼吸道繁殖以外，还可以感染肝细胞、血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、神经胶质细胞等多种 体细胞，并且，腺病毒感染对于受体细胞是否处于分裂期要求不严格；⑤腺病毒载体很容易将外源基因直接转移到靶细胞中，使其获得有效表达。研究证实，用携带 H1N1亚型猪流感病毒HA S~HNA基因的重组腺病毒疫苗（2×109TCID ）对40日龄实验猪免疫2周后，Hl抗体水平超过1：160，能有效抵抗同亚型猪流感强毒株的攻击。人们在不断开发新的活载体基因工程疫苗的同时，也在努 力解决抗原浓缩、二次免疫受初次免疫抗体干扰、部分猪只对细胞疫苗过敏等问题，希望不久的将来这类疫苗能够得到广泛应用，作为传统全病毒灭活疫苗的补充。
　　3 中医治疗猪流感
　 　猪流感作为流感的一种，可以用传统的中医理论和方法进行治疗，从中医角度讲，流感是感受外来邪气，客于肺经，闭其清道，肺气不得下降，其人必定流清涕、 发热、恶风、恶寒、头疼身痛等情形。法宜宣散，如桂枝汤、麻黄汤、葛根汤之类。如不能及时治疗会转为内伤，引发肾阳衰而阴寒内生，肾络通于肺，心肺之阳不 足，不能统摄津液，而流清鼻涕，患者必定没有外感的足征，多困倦无神，或喷嚏不休，或两脚冰冷，法宜扶阳，如四逆汤、白通汤、封髓丹、麻黄附子细辛汤、姜 桂汤之类。
　　中医讲求辨证施治，根据流感不同类型分别治疗，有一诀窍：凡见打喷嚏、流清涕、鼻塞，而无其它症状，就属于内寒感冒，不论轻重，服四逆汤、麻黄附子细辛汤必效，病去药止，不留后遗症。若服其它感冒药，必然无效，而且，还会使病邪加深加重，转成肺肾等重病。
　　所以，治疗流感却服用治疗外感的药物，一定不会有很好的疗效。而且，还会将阴邪敛在体内，到一定时间必定会发作。而现行的中、西医的治疗方法，都具有再次将阴邪收敛的作用，如此经过多次积累，最终造成哮喘、鼻炎、咽炎、气管炎等呼吸系统疾病。
　　中医治疗流感跟西医完全不同，不用去考虑致病的病毒，只根据患者的具体症状进行辨证施治，所以，不论是猪流感还是其它什么流感中医都可以用同样的方法进行治疗，而治疗的前提是辨证。
　 　流感或瘟疫的发病时间和区域都是有其固定的规律可循的。由于流感和瘟疫都有“温”和“燥”的特性，一般都会发生在春、秋两季或季节之交。所以，春季发生 疫情多从南方开始，并逐步随着温度的升高而向北发展；而秋季发生疫情多从北方开始，并逐步随着温度的降低而向南发展。这也是流感病毒（或温疫病毒）会随着 气 候温度和人体温床的变化而发生变异的原因。
　　同时，流感和瘟疫的发生区域往往与当地的生活习惯（生活糜烂）和医疗时尚（滥用补药、寒凉药或 抗生素）有着密切关系。比如：禽畜的瘟疫，主要是由于阉割圈养而活动减少、带激素的饲料喂养、刺激大量产蛋等因素，使禽畜的抵抗力大为减弱，也就难以抵御 瘟疫的侵害。人类感染瘟疫的原因也是由于缺少运动、饮食不节、性交过度造成的元气不足、免疫力低下。
　　总之，随着生物技术的日新月异，猪流感疫苗的研制工作也将不断推进，新型疫苗将更加安全、有效。但必须强调的是，对于猪流感的防控，决不能仅仅依靠疫苗免疫这一种手段，加强日常饲养管理、做好生物安全防护和综合防疫措施才是关键。


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